بکارگیری تکنیک multiplex pcr جهت جداسازی همزمان ژنهای ctxa ، ctxb و zot در ویبریو کلرا ایزوله شده از بیماران

Authors

رضا میرنژاد

reza mirnejad molecular biology research center, baqiyatallah university of medical sciences,tehran,iran.1. مرکز تحقیقات بیولوژی مولکولی دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا...(عج)- تهران- ایران شهرام شجاع

shahram shoja applied microbiology research center, baqiyatallah university of medical sciences,tehran, iran2. مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا...(عج)- تهران- ایران عباسعلی ایمانی فولادی

abbasali imani fooladi molecular biology research center, baqiyatallah university of medical sciences,tehran,iran.2. مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا...(عج)- تهران- ایران

abstract

زمینه و اهداف: سویه های سم زای(toxogenic) ویبریوکلرا که واجد ژن های ctxa،ctxb و zot هستند، نسبت به سویه های غیرسم زابیماری شدیدتری ایجاد می کنند، بنابراین شناسائی دقیق و سریع سویه های سم زا بسیار حائز اهمیت است. این مطالعه با هدف به کارگیری روش multiplex pcr برای جداسازی هم زمان ژن های ctxa ، ctxb و zot در ویبریو کلرا ایزوله شده از بیماران طراحی گردید. مواد و روش کار: در این مطالعه 73 سویه بالینی جمع آوری و با آزمایش های سرم شناختی و زیست شیمیایی به عنوان ویبریوکلرای o1 تشخیص داده شدند. در نهایت به منظور شناسایی ژن های ctxa ، ctxb وzot از روش multiplex pcr استفاده شد و سپس نتایج حاصل با نرم افزار آماری spss16 مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. یافته ها: برطبق نتایج حاصل از multiplex pcr، فراوانی ctxa ، ctxb و zot به ترتیب (66 نمونه) 90.4 %، (66 نمونه) 90.4 % و(67 نمونه) 91.7 % بود. نتایج ما نشان داد که multiplex pcr روشی سریع و دقیق برای جداسازی ویبریوکلرا سم زا در نمونه های بالینی است. هم چنین حساسیت این روش برای جداسازی سویه های ویبریوکلرا که واجد ژن های ctxa ، ctxb وzot هستند، کمتر از 10 کپی ژن مورد نظر در نمونه است. نتیجه گیری: در صورتی که پرایمرهای اختصاصی ( ژن های هدف ctxa ، ctxb وzot ) برای تشخیص ویبریوکلرا سم زا به کار برده شود، روش multiplex pcr یک روش ساده، راحت و نسبتاً ارزان برای جداسازی سریع و دقیق ویبریوکلرا سم زا در نمونه های کلینیکی است.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

بکارگیری تکنیک Multiplex PCR جهت جداسازی همزمان ژنهای ctxA ، ctxB و zot در ویبریو کلرا ایزوله شده از بیماران

زمینه و اهداف: سویه‌های سم‌زای(Toxogenic) ویبریوکلرا که واجد ژن‌های ctxA،ctxB و zot هستند، نسبت به سویه‌های غیرسم‌زابیماری شدیدتری ایجاد می‌کنند، بنابراین شناسائی دقیق و سریع سویه‌های سم‌زا بسیار حائز اهمیت است. این مطالعه با هدف به‌کارگیری روش Multiplex PCR برای جداسازی هم‌زمان ژن‌های ctxA ، ctxB و zot در ویبریو کلرا ایزوله‌شده از بیماران طراحی گردید. مواد و روش کار: در این مطالعه 73 سویه بالی...

full text

شناسایی سریع باکتری ویبریو کلرا با استفاده از واکنش زنجیره‎ای پلیمراز شش‎گانه (Hexaplex PCR)

مقدمه: ویبریو کلرا (عامل بیماری وبا) یک پاتوژن مهم در بروز بیماری اسهال در بخش‌های گسترده‌ای از آسیا و آفریقا است. این باکتری یک پاتوژن روده‌ای است که می‌تواند سبب بروز بیماری همه‌گیر گردد. درنتیجه تشخیص سریع، حساس و اختصاصی ویبریو کلرا، مورد توجه اکثر آزمایشگاه‌های تشخیصی است. هدف از این پژوهش، طراحی و توسعه یک روش سنجش سریع ژنوم باکتری ویبریو کلرا بر اساس واکنش زنجیره‌ای پلیمراز شش‌گانه (Hexa...

full text

کلون کردن قطعه اتصالی m2e آنفلوانزا- ctxB ویبریو کلرا در پلاسمید pET28a

سابقه و هدف: از آنجا که دومین خارجی پروتئین ماتریکس آنفلونزا ایمونوژن ضعیفی است انتخاب مناسبی جهت تولید واکسن نمی باشد. زیرواحد B انتروتوکسین وبا بخش غیر سمی و موجب اتصال هولوتوکسین به GM1 موجود در سطح سلول های اپیتلیال روده می شود. CTB به شدت ایمونوژن می باشد. از اینرو اتصال این دو ژن کاربرد زیادی در تهیه واکسن نوترکیب آنفلونزا خواهد داشت. مواد و روش ها: از طریق PCR و با استفاده از پرایمر های ...

full text

مطالعه وقوع گونه های ویبریو در صدف صید شده از خلیج فارس به روش Multiplex-PCR

بخش عمده‌ای از گونه‌های جنس ویبریو که معمولا در آب‌های گرم یافت می‌شوند، دارای توان بالقوه جهت ایجاد مسمومیت‌های غذائی در انسان هستند. نقش آبزیان و فراورده‌های آبزی در انتقال بیماری اثبات شده است ولی تاکنون مطالعه‌ای در خصوص آلودگی صدف در ایران صورت نپذیرفته است. هدف از انجام این بررسی، مطالعه وقوع آلودگی با گونه‌های ویبریو در صدف صید شده از خلیج فارس با استفاده از تکنیک PCR چندگانه بود. در این...

full text

تولید آنتی‌بادی مرغی ضد زیر واحد B توکسین ویبریو کلرا و راه‌اندازی روش الایزا جهت تشخیص سم‌ ویبریو کلرا

Background: Regarding the importance of rapid detection of cholera toxin in environmental samples, an immunoassay method was developed for direct detection of cytotoxin B. Materials and Methods: The gene sequence of ctxB was cloned to pET28a vector and the recombinant protein was expressed in BL21 (DE3). The recombinant CtxB was purified by affinity chromatography and then used for immunizati...

full text

فراوانی ژنهای حدت در انتروکوک فکالیس جدا شده از نمونه‌های مدفوع با روش Multiplex- PCR

سابقه و هدف: انتروکوک فکالیس (Enterococcus fecalis) به عنوان عامل ایجاد عفونت­های بیمارستانی دارای فاکتورهای بیماریزایی است که در کلونیزاسیون، مقاومت به سیستم ایمنی، رقابت با سایر میکروارگانیسم ها و ایجاد آسیب بواسطه تولید فاکتورهای ترشحی دخالت دارند. هدف این مطالعه بررسی عوامل حدت در انتروکوک فکالیس جدا شده از نمونه­های مدفوعی به روش Multiplex-PCR می­باشد. مواد و روش­ها: در این مطالعه مقطعی، ت...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله میکروب شناسی پزشکی ایران

جلد ۷، شماره ۱، صفحات ۲۲-۲۷

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023